公司简介常用ELISA试剂盒试验原理办法简介
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公司简介常用ELISA试剂盒试验原理办法简介

发布时间:2019-11-20 12:10:02

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  ELISA即酶联免疫吸附试验,其基本原理是将必定浓度的抗原或许抗体经过物理吸附的办法固定于聚苯乙烯微孔板外表,参加待检标本,经过酶标物显色的深浅直接反映被检抗原或许抗体的存在与否或许量的多少。具有快速,定性或许定量乃至定位的特点。

  双抗体夹心法,其基本原理是将必定量的包被抗体以物理吸附的办法固定于聚苯乙烯微孔板外表,参加无关蛋白载体关闭未结合位点,然后参加待检标本,经过参加检测抗体,酶符号第二抗体后用TMB底物显色,微孔板中颜色的深浅与待测物的浓度呈正相关。

  该办法的适用条件是:含有多个抗原表位的大分子物质。由于这种检测办法需求两种抗体,所以就涉及抗体配对的问题。一般来说,ELISA试剂盒常用的抗体配对办法有一下几种:包被抗体为单抗,检测抗体为多抗;包被抗体为单抗,检测抗体为单抗,但这两种单抗针对的抗原表位不同;包被抗体为多抗,检测抗体为多抗,这两种多抗一般是来源于不同的宿主。

  双抗原夹心法,与双抗体夹心法相似,基本原理是将已知浓度的抗原固定于聚苯乙烯微孔板外表,对未结合位点用无关蛋白载体进行关闭后,参加待检样本,然后参加生物素符号的抗原和HRP符号的链霉亲和素,经TMB显色和停止反响,酶标仪读数之后即可计算待测物浓度。双抗原夹心法与直接法都能够对抗体进行检测,可是前者检测的是针对该抗原的所有品种的抗体。

  竞赛法一般分为直接竞赛法和直接竞赛法,这里我们以直接竞赛法为例进行原理解说。直接竞赛法,其基本原理是:将适宜浓度的包被抗体包被于微孔板中,ELISA试剂盒参加无关蛋白载体关闭未结合位点,参加规范品(样本)和生物素符号的抗原物质进行竞赛结合,经适宜的温度和必定时间的孵育,洗刷后,参加HRP符号的链霉亲和素进行反响,TMB显色,微孔板中颜色的深浅与待测物的浓度呈负相关。

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